Faza analitică — cum garantezi că rezultatul e corect
Calibrare, IQC zilnic (Westgard), EQA lunar (RIQAS/INSP). Trepte de rigoare care fac diferența între „număr pe hârtie” și „date pe care se pun paturi la reanimare”.
- Diferența între calibrare, control intern (IQC) și control extern (EQA).
- Diagrama Levey-Jennings și regulile Westgard: 1-2s, 1-3s, 2-2s, R-4s, 4-1s, 10x.
- Ce se întâmplă când un control iese din SD — acțiuni concrete.
- Cum se face verificarea metodei (linearitate, imprecision, exactitate, interferențe).
- Trasabilitatea metrologică — de la etalon internațional la ser pacient.
6.1 Trei niveluri distincte de control
| Tip | Ce face | Frecvență |
|---|---|---|
| Calibrare | Reglează aparatul la răspunsul corect al metodei (curbă standard) | La schimbare lot reactiv / după interval producător / la deviere IQC |
| Control intern (IQC) | Verifică precizia zilnică folosind materiale de control cu valoare țintă cunoscută | Zilnic — min. 2 niveluri (normal + patologic) pe fiecare analit |
| Control extern (EQA) | Compară rezultatele laboratorului cu alte laboratoare pe aceleași probe „blind” | Lunar / trimestrial (RIQAS, INSP, alte scheme) |
6.2 Diagrama Levey-Jennings
Fiecare zi se plotează valoarea IQC pe grafic cu media și liniile ± 1SD, 2SD, 3SD (deviație standard stabilită din 20 măsurători inițiale). Vizual, sesizezi tendințe și abateri.
6.3 Regulile Westgard
| Regula | Descriere | Semnificație |
|---|---|---|
| 1-2s | Un control depășește ± 2SD | Avertisment — verifică; NU respinge singură |
| 1-3s | Un control depășește ± 3SD | Eroare aleatorie — respinge lot, calibrare, recolt controale |
| 2-2s | 2 controale consecutive de aceeași parte peste ± 2SD | Eroare sistematică — investigație |
| R-4s | Diferența între 2 controale > 4SD (unul +2SD, altul –2SD) | Eroare aleatorie amplă — respinge |
| 4-1s | 4 controale consecutive de aceeași parte peste ± 1SD | Tendință deriva calibrare |
| 10x | 10 controale consecutive de aceeași parte a mediei | Shift sistematic — recalibrare |
1-2s = „stai și verifică”. 1-3s / 2-2s / R-4s = „NU eliberi rezultate până nu rezolvi”. Această rigoare e diferența dintre un laborator care „pare” OK și unul acreditat 15189.
6.4 Ce faci când un control cedează
- Repetă imediat IQC (poate fi eroare pipetare, tub greșit);
- Dacă rămâne în afară → repetă cu un nou vial de control (poate fi degradare);
- Verifică lotul de reactiv (a expirat? contaminat?);
- Rulează calibrarea nouă;
- Dacă persistă → suna la service (aparatul are defecțiune) → nu eliberi rezultate pe analit;
- Documentează totul în „registru non-conformități” (obligatoriu ISO 15189).
6.5 EQA — Control extern
| Schemă EQA | Cine oferă | Ce trimit |
|---|---|---|
| RIQAS (Randox International Quality Assessment) | Randox (UK) | Materiale liofilizate lunar pe biochimie, hematologie, imunologie |
| INSP (Programe Naționale EQA) | INSP | Serologii virale, TB, HIV, HPV, EQA microbiologie |
| LabQuality (Finlanda) | Voluntar | Multi-parametric, inclusiv coagulare, endocrinologie |
| CAP Survey (SUA) | College of American Pathologists | Prestigios; scump; unele laboratoare private |
Rezultatul EQA vine cu un raport statistic: Z-score, deviație relativă vs valoarea „consensus” a laboratoarelor participante. Z-score între –2 și +2 = acceptabil. În afară = investigație.
6.6 Trasabilitate metrologică
Un rezultat de glicemie „5.5 mmol/L” trebuie să fie trasabil pana la un etalon internațional (NIST — National Institute of Standards and Technology, SUA, sau BIPM). Lanțul: metoda de rutină → material de control → material de referință secundar → material de referință primar → etalon internațional. Fără trasabilitate, două laboratoare pot da valori diferite pentru „ADEVĂRUL”.
6.7 Verificarea metodei la implementare
| Parametru | Cum se verifică |
|---|---|
| Imprecision (repetabilitate + reproductibilitate) | 20 replicate x 5 zile, calcul CV% |
| Exactitate (bias) | Comparație cu metoda de referință sau MRC (Material Referință Certificat) |
| Linearitate | Diluții seriate, verificarea răspunsului liniar pe interval declarat |
| Limite (LoD, LoQ) | Cea mai mică cantitate detectabilă / cuantificabilă |
| Interferențe | Hemoliză, lipemie, icterus — pe fiecare metodă |
| Interval de referință | Adoptat de la producător + verificat pe 20 subiecți populației locale |
- Când distribuitorul schimbă lotul de reactiv, RECALIBREAZĂ + rulează IQC nou + verifică bias — un lot nou poate șifta valorile.
- Un aparat care „pică IQC-ul dimineața dar e OK după masa” de obicei are probleme de temperatură (aer condiționat) sau de rezervă apă distilată.
Vineri dimineață, IQC glucoză nivel 2: +2.4 SD (regula 1-2s → avertisment). Ora 10: nivel 1 +2.1 SD, nivel 2 +2.6 SD (regula 2-2s → respinge lot). Verificare: lot reactiv nou instalat cu 2 zile în urmă, calibrare inițială OK. Rerun calibrare → shift 5% valoare țintă. Investigație: manualul nou lot impune un factor de conversie modificat, nedocumentat de operator. Aplicare factor + recalibrare + IQC OK. Rezultatele emise între instalare lot și detecție — reprocesate (declanșare notificare clinicieni). Fără Westgard, ar fi rămas ascuns.